QC 實驗室中的不合格 (OOS) 調查有多重要？
簡短的回答是：非常重要。對於內毒素檢測，OOS 是指超過產品內毒素限值的結果，並可能在兩個方面成本很高：
- 進行調查所花費的時間和資源
- 在 OOS 調查中確定並確認根本原因之前暫停產品生產
著手調查 OOS 結果的根本原因，往往需要實驗室利用深入的調查工具來排除其他潛在的原因，並就後續工作做出科學決策。 OOS 結果的一個例子是，一個產品的鱟試劑細菌內毒素檢測極限 <1 EU/mL，但回收率為 2 EU/mL。所有 OOS 結果都需要進行調查，主要目的是確定是否有可指出的原因或是否可以確定可指出的原因。 OOS 內毒素結果在病人安全方面尤其令人擔憂，因為藥品中有高含量的內毒素，如果被使用，會引起不良反應。因此，在放行或放棄藥品批次之前調查這些結果並找到根本原因非常重要。本文引用了美國食品藥物管理局（FDA）的《行業指南：調查藥品生產的不合格（OOS）檢測結果》（U.S. FDA Guidance for Industry: Investigating Out-of-Specification (OOS) Test Results for Pharmaceutical Production），本文旨在總結和回顧該指南。
OOS 調查可分為兩部分¹：
- 第 1 階段：實驗室調查
- 第 2 階段：全面的 OOS 調查
調查應從實驗室開始，如果沒有發現明顯的實驗室誤差，則應對所有其他相關部門進行調查。 OOS 的第 1 階段（實驗室調查）應包括對實驗室數據準確性的初步評估，包括審查分析人員的培訓記錄、檢測表格、試劑到期、使用的設備和檢測控制。如有可能，應在檢測溶液製備之前就開始，如樣品稀釋的誤差就被排除了¹。這樣，關於實驗室誤差或儀器故障的假設就可以使用相同的檢測溶液製備來測試。
如果此初步評估表明，在得出數據時所用的分析方法沒有因果關係的錯誤，則應進行全面的 OOS 調查 (第 2 階段) ¹。分析人員確定 OOS 結果後，應立即記錄在案，並應識別任何潛在的分析人員錯誤。測試分析人員的職責首先是獲得準確的內毒素結果。訓練有素的分析人員應該意識到檢測過程中可能出現的潛在問題。分析人員還應在排除檢測溶液製備和通知實驗室主管評估 OOS 結果之前，確保數據完整且準確。一旦確定，主管對 OOS 的評估必須是客觀且及時的。 OOS 評估應包括：
- 確認分析人員的知識
- 原始數據審查
- 計算過程的確認
- 確認試劑、標準品和儀器的正確使用
- 以上所有內容的正式文件
當有明顯的實驗室誤差證據時，實驗室檢測結果應無效 ¹。如果不存在明顯的實驗室誤差並且確認了 OOS 結果，則必須在公司程序中的適當或指定時間範圍內向品質保證部門報告。一旦收到通知，應該與不同部門進行跨職能通報，以確定嚴重程度並進行全面調查。調查描述可以包括假設、要檢測的樣本、重複次數以及如何記錄。區分 OOS 結果和無效結果至關重要。無效檢測是指系統適用性參數未如預期運行，因此可能會影響檢測結果的準確性。這樣的系統適用性參數可以是：
- 陰性對照 (標準曲線範圍內的陽性凝膠或反應時間)
- 陽性產品對照 PPCs (50%–200% 以外)
- 線性標準曲線的生成
- %CV (超出設定限值，如適用)
不符合上述有效性標準的無效化驗，將導致從最初的樣品開始，重新檢測。已經確認的無效結果仍需要進行調查，但只是實驗室調查，不是 OOS。如果重新測試，證明與第一次測試結果相同，例如加標回收率在 50%–200% 範圍之外，將需要進一步的調查。
第 2 階段的目標是在第 1 階段的初步評估未確定實驗室誤差導致 OOS 的情況下，確定產品不合格的原因。此階段可能包括生產流程審查和/或額外的實驗室工作。此類調查的目標應該是確定 OOS 結果的根本原因並採取適當的糾正和預防措施 (CAPA，Corrective Action & Preventive Action) ¹。在此階段重新檢測樣品很重要，因為這可以確定是否真的存在 OOS 結果，或者過程中是否發生了某種類型的妥協。重新檢測應由未執行初始檢測的分析人員對相同樣本的相等份量進行。在公司的標準作業程序（SOP）中應規定在調查啟動和結束之前的重新檢測次數。這將有助於避免檢測合規，即對樣品進行一定次數的檢測，直到收到通過結果並且忽略 OOS。如果重新檢測確認了 OOS 結果，則有必要進一步深入生產流程和批次審查，以找到根本原因。這可能包括，例如，檢查原材料或記錄該特定批次的成分變化。建議使用魚骨圖（Ishikawa）或「5 Why 分析法」等根本原因分析工具之一來確定 OOS 結果的根本原因。
QC實驗室的控制狀態非常重要。可以使用已建立的品質管理系統來控制流程，如培訓、SOP和文件、調查、CAPA和流程監控。所有實驗室都會產生和收集數據，如內毒素結果，這些數據可用於減少變異性並提高內毒素流程的有效性，例如在生產過程中透過下游和純化工作來成功去除內毒素。調查對於分析和改進流程非常重要。使用根本原因分析工具（如魚骨圖或「5 Why分析法」）可以幫助實驗室明確根本原因並確定OOS結果的嚴重程度。一旦對真正的OOS進行徹底調查並確認或拒絕，品質控制和品質保證團隊就可以決定後續工作——拒絕或接受並放行。
總之，關鍵是要記住 QC 檢測的主要目標是患者的安全。內毒素是一項關鍵的放行檢測，因此所有最終放行的藥品都必須通過實驗室規定的內毒素限值。如果產品未能透過內毒素限值檢測，則必須在產品放行前對結果進行徹底調查，以實現患者安全的目標。
Hayden Skalski｜PROFILE
Hayden 是 Sievers 分析儀生命科學產品應用專家，專門從事細菌內毒素檢測。 Hayden 在製藥業和品質控制微生物學方面擁有超過8年的經驗，並就圍繞內毒素檢測的眾多主題發表過演講。先前，Hayden 曾在 Charles River Laboratories、Regeneron 和 Novartis 任職，負責驗證和執行內毒素檢測的方法開發方案，提供客戶支援、故障排除和支援大量產品檢測。 Hayden 擁有紐約州立大學奧爾巴尼分校的生物學學士學位。
參考文獻
U.S. Food and Drug Administration. May 2022. Guidance for Industry: Investigating Out-of-Specification (OOS) Test Results for Pharmaceutical Production. Silver Spring, MD: U.S. Department of Health and Human Services.
