鱟（hòu）與製藥和醫療器材製造之間的聯繫是當今生物醫學行業的一個重要課題 —— 該行業在優先考慮可持續發展的同時，還要確保為患者提供的產品的安全性和品質。鱟血液中含有用於製造鱟變形細胞裂解物（LAL，limulus amebocyte lysate）的因子。鱟試劑是一種可以測試藥品或醫療器材是否被細菌內毒素污染的試劑。透過一系列的級聯反應，鱟血液因子會形成一個凝血機制，可以檢測是否引入任何細菌危害。這項測試對於檢測危險以及潛在的致命污染物至關重要，但對鱟及其被人們需要的血液，帶來了壓力。
大西洋鱟 – 美洲鱟，是一種海洋節肢動物，生活在北美和中美洲的東海岸。特拉華灣有著世界上最大的產卵族群。 ¹鱟物種大約有 4.5 億年的歷史，由於其獨特的血液，是世界上研究最多的無脊椎動物之一。鱟廣泛用於以下用途：如鳥類的食物來源（蛋）、商業鰻魚和海螺漁業的餌料以及生物醫學工業。 ¹允許下誘餌來捕捉鱟，特別是在東北地區，被認為是大西洋鱟物種死亡和數量下降的主要原因。據報道，2020 年大西洋海岸範圍內鱟誘餌捕捉上岸量為 456,675 隻。 ¹ 在大西洋東南部的南卡羅來納州，法律規定禁止利用誘餌來捕捉鱟。 ² 所有捕獲和收集鱟的漁場必須持有相關商業、教育或私人目的許可證。 ² 這條法律對鱟族群保護極為重要，因為能夠使鱟族群在東南部繁殖，並保護鱟物種免遭誘捕。如前所述，大量大西洋鱟被收集用於生物醫學產業，以支持鱟試劑的生產。鱟血液是透過採集和提取成年鱟的一部分血液來獲得。依照漁業管理計畫（FMP）的要求，由生物醫學產業收集和抽血後的鱟大多放生於其生存的水域；然而，部分鱟在此過程中死亡。 ¹ 根據 2021 年州合規報告，與主要死亡原因誘捕相比，鱟族群因生物醫學而導致的死亡率非常低。 2019 年，在鱟基準種群評估中，按地區對鱟資源的種群狀況進行了評估，發現隨著時間的推移，特拉華灣和東南部地區的種群分別保持一致的中性和良好狀態。¹
由於對鱟種群的擔憂以及在生物醫學方面對其血液的依賴，近年來對細菌內毒素檢測的替代方法的認識有所提高。重組 C 因子（rFC）和重組鱟試劑（rLAL）是兩種不使用鱟血液的替代方法。 rFC是鱟凝血機制中的第一個凝血酶，rFC 法採用 C 因子克隆。這種替代方法屬於終點法，意味著在測試開始時讀取一個讀數，然後在測試結束時讀取一個讀數。當檢測到內毒素時，它會透過螢光讀取器放大螢光底物來運作。由於這是檢測細菌內毒素的替代方法，公司必須進行額外的嚴格測試，以證明與藥典內毒素檢測方法的等效性。 FDA 已經認可 rFC 是一種替代方法，如果替代方法和/或程序在準確性、靈敏度、精確度、選擇性或對自動化或計算機化數據簡化適應性方面以及在其它特殊情況下具有優勢，各州公司可以使用替代方法和/或程序。 ³ 如果公司選擇採用 rFC 分析，則應根據 USP <85> 細菌內毒素試驗和 USP <1225> 中藥典程序驗證中規定的要求對替代方法進行驗證。 ³
重組鱟試劑或 rLAL 測試也是一種替代測試
它利用與傳統鱟試劑相同的級聯反應。這意味著它包含了採用重組製備過程檢測鱟血液中內毒素的所有因子。 ⁴ 這對於使用重組試劑向前邁進了一步，因為它包含所有凝血因子，並透過吸光度讀取器進行傳統的動力學分析。雖然這是內毒素檢測無動物測試的進步，但它仍然被認為是一種替代方法，如果公司選擇採用這種分析方法，則必須採用與 rFC 相同的檢測時間和嚴格的過程。由於嘗試驗證和實施內毒素檢測替代方法並不容易，一些公司可能會問目前到底有什麼其它解決方案可以幫助實現更永續和更有效的方法來檢測產品的內毒素。
Sievers® Eclipse 細菌內毒素檢測儀是一種在降低鱟試劑使用量同時又滿足合規性上具有顯著優勢的解決方案。 Eclipse 可將鱟試劑的使用降低 90%，同時滿足所有全球製藥法規要求。與傳統的鱟試劑方法如 96 孔板和凝膠法相比，這是一個實質的進步。 Sievers Eclipse 設計了一種新型微孔板，利用向心力、計量室和微流體通道來提高鱟試劑和樣品的準確性並有助於快速分散。與傳統內毒素分析一樣，微流體系統能夠使您進行相同的生物化學分析，但實際操作量最小，一致性更高，試劑消耗量大大降低。透過減少高達 90% 的鱟試劑的使用，Eclipse 減少了對地球上最靈敏、無與倫比的天然內毒素檢測試劑的需求。 Eclipse 採用 FDA 許可的市售鱟試劑，並且符合全球藥典法規，包括但不限於美國藥典 USP <85>、中國藥典 ChP 四部 <1143>、歐洲藥典 EP 2.6.14 和日本藥典 JP 4.01 中規定的所有要求。這能夠使用戶意識到需要保護當今寶貴的自然資源，同時仍必須符合藥物和醫療器材製造商必須滿足的嚴格的分析和監管要求。
參考文獻
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Floyd, B., & DeLancey, L. (2012, March 1). South Carolina Horseshoe Crab Fishery and Management Program Compliance Report for the Year 2011. Retrieved from https:// www.dnr.sc.gov/marine/mrri/pubs/SCComplianceHSC2011.pdf
1. U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration. (2012, June). Guidance for Industry: Pyrogen and Endotoxins Testing: Questions and Answers.
Associates Of Cape Cod Incorporated. (n.d.). Recombinant LAL Reagent PyroSmart NextGen™ Instructions For Use.
